基因工程原理练习题及其答案
一、填空题
1. 基因工程是_________年代发展起来的遗传学的一个分支学科。
2. 基因工程的两个基本特点是: (1)____________,(2)___________。
3. 基因克隆中三个基本要点是:___________;_________和__________。
4. 通过比较用不同组合的限制性内切核酸酶处理某一特定基因区域所得到的不同大小 的片段,可以构建显示该区
域各限制性内切核酸酶切点相互位置的___________。
5. 限制性内切核酸酶是按属名和种名相结合的原则命名的,第一个大写字母取自_______,第二、三两个字母取自
_________,第四个字母则用___________表示。
6.部分酶切可采取的措施有:(1)____________(2)___________ (3)___________等。
7.第一个分离的限制性内切核酸酶是___________;而第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是_____________。
8.限制性内切核酸酶 BsuRI 和 HaeⅢ的来源不同,但识别的序列都是_________,它们属于_____________。
9.DNA 聚合酶 I 的 Klenow 大片段是用_____________切割 DNA 聚合酶 I 得到的分子量为 76kDa 的大片段,具有两种
酶活性: (1)____________; (2)________________的活性。
10.为了防止 DNA 的自身环化,可用_____________去双链 DNA__________________。
11.EDTA 是____________离子螯合剂。
12.测序酶是修饰了的 T7 DNA 聚合酶,它只有_____________酶的活性,而没有_______酶的活性。
13.切口移位(nick translation)法标记 DNA 的基本原理在于利用_________的_______和______的作用。
14 . 欲 将 某 一 具 有 突 出 单 链 末 端 的 双 链 DNA 分 子 转 变 成 平 末 端 的 双 链 形 式 , 通 常 可 采 用 _________ 或
_______________。
15.反转录酶除了催化 DNA 的合成外,还具有____________的作用,可以将 DNA-
RNA 杂种双链中的___________水解掉。
16.基因工程中有 3 种主要类型的载体: _______________、_____________、______________。
17.就克隆一个基因(DNA 片段)来说,最简单的质粒载体也必需包括三个部分:_______________、_____________、
______________。另外,一个理想的质粒载体必须具有低分子量。
18. 一个带有质粒的细菌在有 EB 的培养液中培养一段时间后,一部分细胞中已测
不出质粒,这种现象叫 。
19. pBR322 是一种改造型的质粒,它的复制子来源于 ,它的四环素抗性基 因来自于 ,
它的氨苄青霉素抗性基因来自于 。
20.YAC 的最大容载能力是 ,BAC 载体的最大容载能力是 。
21.pSCl01 是一种 复制的质粒。
22.pUCl8 质粒是目前使用较为广泛的载体。pUC 系列的载体是通过
和 两种质粒改造而来。它的复制子来自 ,Amp
抗性基因则是来自 。
23.噬菌体之所以被选为基因工程载体,主要有两方面的原因:一是 ; 二是 。
24. 野生型的 M13 不适合用作基因工程载体,主要原因是
和 。
25. 黏粒(cosmid)是质粒—噬菌体杂合载体,它的复制子来自 、COS 位点序列来自 ,最
大的克隆片段达到 kb。
26. 野生型的�噬菌体 DNA 不宜作为基因工程载体,原因是:(1)
(2) (3) 。
27.噬菌粒是由质粒和噬菌体 DNA 共同构成的,其中来自质粒的主要结构是 ,而来自噬菌体的主
要结构是 。
28.�噬菌体载体由于受到包装的限制,插入外源 DNA 片段后,总的长度应在噬菌体基
因组的 的范围内。
29. 在分离 DNA 时要使用金属离子螯合剂,如 EDTA 和柠檬酸钠等,其目的是
。
30. 用乙醇沉淀 DNA 时,通常要在 DNA 溶液中加人单价的阳离子,如 NaCl 和 NaAc,
其目的是 。
31. 引物在基因工程中至少有 4 个方面的用途:(1) (2)
(3) (4) 。
32.Clark 发现用 Taq DNA 聚合酶得到的 PCR 反应产物不是平末端,而是有一个突出
碱基末端的双链 DNA 分子。根据这一发现设计了克隆 PCR 产物的 。
33.在 cDNA 的合成中要用到 S1 核酸酶,其作用是切除在
。
34.乙醇沉淀 DNA 的原理是 。
35. 假定克隆一个编码某种蛋白质的基因,必须考虑其表达的三个基本条件:
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