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用ModFit软件分析DNA倍体和细胞周期.ppt
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用ModFit软件分析DNA倍体和细胞周期.ppt
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DNA倍体和细胞周期分析
2021/3/29 星期一 1
细胞周期和DNA倍体分析的原理
G0/G1期DNA含量为2C
S期细胞,DNA含量开始增加,>2C
G2/M期细胞,DNA含
量开始增加至4C
1、正常细胞DNA含量稳定在2C水平
2、性细胞DNA含量为1C
3、处于增殖期至分裂期细胞由
2C增加至4C
4、凋亡细胞DNA断裂,含量<2C
2021/3/29 星期一 2
细胞经荧光染料(碘化丙啶,PI)染色,用流式细胞仪测定细胞
DNA含量,可得到细胞周期三个时相(G0/G1、S和G2/M期)的DNA
含量(%),可以反映细胞的增殖状态和非二倍体(异倍体)的
DNA含量
Diploid: 100.00 %
Dip G1: 54.38 % at 46.90
Dip G2: 15.91 % at 91.61
Dip S: 29.71 % G2/G1: 1.95
%CV: 5.23
G0/G1
S G2/M
2021/3/29 星期一 3
DNA检测的常用术语
• 表示流式分析中DNA含量的分
辨率或精确度。
• 通常由G0/G1峰的CV来反映【
%CV=(SD/mean)x 100】。
• 影响CV的因素主要包括两方面
:仪器因素(如液流、光路、机
器调试等)和样本制备及染色过
程对标本的人为影响。
1. 变异系数(Coefficient of Variation,CV)
2021/3/29 星期一 4
• DI指的是肿瘤样本G0/G1峰的平均道数与人正常二倍体G0/G1
峰的平均道数之间的比值。
• DI为1 意味着二倍体(2c)(一般正常范围为0.9~1.1)。
• 倍体(Ploidy):原指染色体数目。流式中用来描述总的
DNA含量。
• 二倍体细胞有正常细胞的DNA含量但不除外染色体异常。
• DI为1.9-2.1 的细胞为四倍体(CV为5%时)。在二倍体和四
倍体区域之外的统称异倍体。
2. DNA指数(DNA index,DI)和倍体(Ploidy)
DNA检测的常用术语
2021/3/29 星期一 5
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