根据提供的文档内容,我们可以整理出以下相关知识点: ### 一、选择题解析 #### 1. 基因工程的创始人是谁? - **答案**:C. P. Berg - **解析**:Paul Berg 因其在基因工程领域的开创性工作而被认为是该领域的创始人之一。他首次成功实现了将两个不同来源的DNA片段连接在一起的技术,这项技术后来成为基因工程技术的基础。 #### 2. 关于宿主控制的限制修饰现象的本质,下列描述中哪个不太恰当? - **答案**:B. 这一系统中的核酸酶都是Ⅱ类限制性内切核酸酶 - **解析**:限制性内切酶可以分为几类,其中Ⅱ类限制性内切酶是最常见的类型,用于切割特定的DNA序列。但是,并非所有宿主系统的限制-修饰系统都仅依赖于Ⅱ类限制性内切酶。实际上,还有一些其他类型的限制性内切酶参与这个过程。 #### 3. 在 DNA 的 3’-5’链上,基因的起始密码子是什么? - **答案**:A. ATG(或 GTG) - **解析**:ATG 是最常见的起始密码子,在大多数生物中,它编码甲硫氨酸并标志着蛋白质合成的起点。GTG 在某些情况下也可以作为起始密码子,但远不如 ATG 普遍。 #### 4. II 限制性内切核酸酶可以特异性地识别什么? - **答案**:B. 双链 DNA 的特定碱基序列 - **解析**:II 类限制性内切酶能够特异性识别双链DNA上的特定碱基序列,并在其两侧进行切割。这种特异性使得它们成为基因工程中非常重要的工具。 #### 5. 末端转移酶是合成酶类,具有什么活性? - **答案**:B. 5’→3’DNA 聚合酶 - **解析**:末端转移酶是一种特殊的DNA聚合酶,能够在DNA分子的3'端添加核苷酸,从而延长DNA链。它没有3'→5'的活性,因此选项A不正确。 #### 6. 下面关于松弛型质粒(relaxed plasmid)性质的描述中,哪个是不正确的? - **答案**:C. 通常带有抗药性标记 - **解析**:松弛型质粒的特点是不受宿主复制机制的严格控制,因此拷贝数较高。它们可以在氯霉素的作用下扩增,并且与严紧型质粒融合后,杂合质粒优先使用松弛型质粒的复制子。但是,并不是所有的松弛型质粒都必然携带抗药性标记。 #### 7. 关于 cDNA 的最正确的说法是什么? - **答案**:C. 以 mRNA 为模板合成的双链 DNA - **解析**:cDNA (complementary DNA) 是通过反转录酶以mRNA为模板合成的DNA。最初合成的是单链DNA,随后可以通过DNA聚合酶合成互补链形成双链DNA。 #### 8. 关于 T4 DNA Ligase,下列说法中哪一项不正确? - **答案**:C. 不但能连接粘性末端。 - **解析**:T4 DNA连接酶是一种广泛使用的DNA连接酶,它可以连接粘性末端,同时也能连接平末端。最适反应温度通常是37℃。选项C的表述不完整,缺乏具体的信息。 #### 9. 下列关于建立 cDNA 文库的叙述中,哪个是错误的? - **答案**:A. 从特定组织或细胞中提取 DNA 或 RNA - **解析**:建立cDNA文库时,首先需要从特定组织或细胞中提取RNA,而不是DNA。然后通过反转录酶将mRNA转化为单链DNA,再合成双链DNA。 #### 10. 用下列方法进行重组体的筛选,只有哪个说明外源基因进行了表达? - **答案**:C. Western 印迹 - **解析**:Western印迹是检测蛋白质的一种方法,如果在外源基因表达的产品中检测到了相应的蛋白质,则说明外源基因已经进行了表达。 ### 二、填空题解析 #### 1. 限制性内切核酸酶分为三类,基因工程中应用的是哪一类? - **答案**:II类 - **解析**:II类限制性内切酶是基因工程中最常用的类型,它们能够识别特定的DNA序列并在序列内部或附近进行切割。 #### 2. 为了防止 DNA 的自身环化,可用什么去双链 DNA? - **答案**:磷酸酶 - **解析**:使用磷酸酶处理DNA可以去除5'端的磷酸基团,阻止DNA分子自身的环化。 #### 3. 切口平移(nick translation)法标记 DNA 探针时应用的酶是什么? - **答案**:DNA 聚合酶 I - **解析**:切口平移法是一种标记DNA探针的方法,利用DNA聚合酶I在切口处进行DNA合成,并在合成过程中引入标记的核苷酸。 #### 4. 基因工程中的 3 种主要类型的载体是什么? - **答案**:质粒、噬菌体、病毒 - **解析**:质粒是最常用的载体,用于携带外源DNA进入宿主细胞;噬菌体和病毒载体则适用于特定的应用场景。 #### 5. 野生型的 M13 不适合用作基因工程载体的原因有哪些? - **答案**:复制效率低、包装容量有限、稳定性差 - **解析**:野生型M13噬菌体作为载体存在一些缺点,如复制效率相对较低、能够携带的外源DNA长度有限以及在宿主细胞内的稳定性不佳等。 #### 6. 黏粒(cosmid)是什么样的杂合载体? - **答案**:结合了质粒和噬菌体λ DNA 特征的载体 - **解析**:黏粒是一种特殊类型的载体,它结合了质粒和噬菌体λ DNA的特征,既能像质粒一样自我复制,又能携带较大的DNA片段。 #### 7. 引物在基因工程中有哪 4 个方面的用途? - **答案**:PCR 扩增、测序、连接、标记 - **解析**:引物在基因工程中的用途广泛,主要包括:作为PCR扩增的启动子、用于DNA测序、作为连接DNA片段的桥梁以及用于标记DNA片段。 #### 8. Northern 印迹和 Southern 印迹有两点根本的区别是什么? - **答案**:检测的对象不同、探针的类型不同 - **解析**:Southern印迹主要用于检测DNA,而Northern印迹用于检测RNA;此外,它们使用的探针类型也有所不同。 #### 9. PCR 反应中常用的酶是什么? - **答案**:Taq DNA聚合酶 - **解析**:Taq DNA聚合酶是一种耐热的DNA聚合酶,常用于PCR反应中。 #### 10. 感受态的大肠杆菌细胞在哪个温度下吸附 DNA,在哪个温度下摄取外源 DNA? - **答案**:4°C 吸附 DNA,42°C 摄入外源 DNA - **解析**:感受态的大肠杆菌在低温(通常是4°C)条件下更容易吸附DNA,而在较高的温度(如42°C)下可以有效地摄入外源DNA。 #### 11. 用碱法分离质粒 DNA 时,染色体 DNA 为什么可以被除去? - **答案**:染色体 DNA 在碱性条件下会断裂成较小的片段 - **解析**:在碱性条件下,染色体DNA会断裂成较小的片段,而质粒DNA由于较小且较为稳定,可以在碱性条件下去变性后重新复性,从而实现质粒DNA与染色体DNA的分离。 #### 12. 除具有较低的分子量外,一个理想的质粒载体必需包括哪些部分? - **答案**:复制起点、选择标记、多克隆位点 - **解析**:一个理想的质粒载体必须包含复制起点(允许载体在宿主细胞中自我复制)、选择标记(如抗性基因,用于筛选含有载体的宿主细胞)以及多克隆位点(允许插入外源DNA片段)。 #### 13. 转基因植物操作中常用的载体是什么? - **答案**:Ti 质粒 - **解析**:Ti质粒是一种来源于农杆菌的质粒,常用于植物基因工程中,因为它们能够高效地将外源DNA转入植物细胞中。 #### 14. PCR 技术的核心步骤是什么? - **答案**:变性、退火、延伸 - **解析**:PCR技术的基本步骤包括变性(使DNA双链分离)、退火(引物与模板DNA结合)和延伸(DNA聚合酶沿模板DNA合成新的DNA链)。 以上内容总结了题目中的知识点,并进行了详细的解释。
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