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荧光定量 PCR 的原理及使用

荧光定量 PCR(FQ-PCR)是新近出现的一种定量 PCR 检测方法。其根本特

点是：1、用产生荧光信号的指示剂显示扩增产物的量。2、荧光信号通过荧光

染料嵌入双链 DNA，或双重标记的序列特异性荧光探针或能量信号转移探针等

方法获得，大大提高了检测的灵敏度、特异性和准确性。3、动态实时连续荧

光检测，免除了标本和产物的污染，且无复杂的产物后续处理过程，高效、快

速。下面介绍常用的几种检测方法：

荧光信号急剧减弱。因此，在一个体系内，其信号强度代表了双链 DNA 分子的

数量。SYBR Green 荧光染料法定量 PCR 的根本过程是：1、开场反响，当

SYBR Green 染料与 DNA 双链结合时发出荧光。2、DNA 变性时，SYBR

Green 染料释放出来，荧光急剧减少。3、在聚合延伸过程中，引物退火并形

成 PCR 产物。4、聚合完成后，SYBR Green 染料与双链产物结合，定量 PCR

系统检测到荧光的净增量加大。

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