本篇硕士论文主要探讨了荧光定量PCR（Fluorescence Quantitative Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction，FQ-RT-PCR）技术在检测白血病WT1基因表达及其临床应用中的价值。WT1基因（Wilms' Tumor 1 gene）是白血病研究中的一个重要分子标志，它在不同类型的白血病中具有不同的表达模式。
首先，研究建立了FQ-RT-PCR方法来定量检测WT1基因的表达。通过常规RT-PCR对K562细胞的WT1基因和P-actin基因进行扩增，随后进行凝胶提取、纯化和光度计定量，以构建定量标准模板。利用此方法，对80例白血病患者的外周血或骨髓样本以及10例正常人的外周血样本进行了检测。
结果表明，WT1基因在所有类型的白血病中均呈现高水平表达，与正常对照组相比差异显著。在髓系白血病中，其表达量高于淋巴系，尤其在M5（急性单核细胞白血病）亚型中表达显著降低。此外，WT1基因的表达水平与患者的性别、初诊时的白细胞计数以及染色体核型无明显关联。
进一步的研究发现，高水平的WT1表达与较低的完全缓解率（CR率）、较短的生存期和较差的预后相关。在15例急性白血病患者中进行长期跟踪检测，4例已达到完全缓解的患者在3.7个月后复发，其中2例在临床复发前1-2个月，WT1基因的表达水平明显升高，至少上升了一个对数级别。而3例对诱导化疗耐药的患者，其WT1水平始终没有明显变化。
因此，结论指出，FQ-RT-PCR技术检测WT1基因具有高灵敏度和高特异性。与正常人相比，WT1基因在各类白血病中的高表达与疾病状态相关。该方法可作为监测急性白血病患者微小残留病（Minimal Residual Disease, MRD）的重要工具，有助于早期发现疾病的复发和进展。
关键词：白血病、微小残留病、WT1基因、荧光定量RT-PCR
综上所述，这篇论文揭示了WT1基因在白血病中的重要作用，特别是在评估疾病进程和预测患者预后方面。FQ-RT-PCR技术的应用为临床提供了更精确的诊断和监测手段，对于白血病的个体化治疗和疾病管理具有重要意义。
