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鸟枪法克隆目的基因的基本战略
染色体DNA的切断
超声波处理:片段长度均一,大小可控,平头末端
全酶切: 片段长度不均一,粘性末端便于连接,但有可能使目的基因断开,
大小不可控
部分酶切: 片段长度可控,含有粘性末端,目的基因完整
与载体连接
如果转化子采用菌落原位杂交法或限制性酶切图谱法筛选,则选择多拷贝克隆载
体;如果转化子采用基因产物功能检测法筛选,则选择表达型载体
如果转化子采用菌落原位杂交法或限制性酶切图谱法筛选,则选择大肠杆菌作为
转化受体细胞
受体细胞;如果转化子采用基因产物功能检测法筛选,则选择能使目的基因表达
的受体细胞
筛选含有目的基因的目的重组子
菌落原位杂交法、基因产物功能检测法(筛选模型的建立)
11/12/2022
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