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重组DNA技术与基因工程讲义.ppt
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重组
DNA
技术与基因工
程讲义
A
酵母作为表达外源基因受体的特征
n
6
外源基因在酵母中的表达
酵母(
Yeast
)是一群以
芽殖
或
裂殖
方式进行
无性繁殖
的单细胞
半知菌类
(
半知酵母
),共由
56
个属、
500
多个种组成。如果说大肠
杆菌是外源基因最成熟的原核生物表达系统,则酵母菌是最成熟的真
核生物表达系统。
酵母的分类学特
征
真核生物
,分属于
子囊菌纲
(子囊酵母)、
担子菌纲
(担子酵母
)、
A
酵母作为表达外源基因受体的特征
n
6
外源基因在酵母中的表达
酵母表达外源基因的优
势
全基因组测序,基因表达调控机理比较清楚,遗传操作简便
能将外源基因表达产物分泌至培养基中
具有原核细菌无法比拟的真核蛋白翻译后加工系统
大规模发酵历史悠久、技术成熟、工艺简单、成本低廉
不含有特异性的病毒、不产内毒素,美国
FDA
认定为安全的
基因工程受体系统(
Generally Recognized As Safe GRAS
)
酵母菌是最简单的真核模式生物
B
酵母的宿主系统
n
6
外源基因在酵母中的表达
提高重组蛋白表达产率的突变宿
主
抑制超糖基化作用的突变宿主
减少泛素依赖型蛋白降解作用的突变
宿主
广泛用于外源基因表达的酵母宿
主
广泛用于外源基因表达的酵母
宿主
目前已广泛用于外源基因表达和研究的酵母包括:
酵母属
如
酿酒酵母
(
Saccharomyces cerevisiae
)
克鲁维酵母属
如乳酸克鲁维酵母(
Kluyveromyces lactis
)
毕赤酵母属
如
巴斯德毕赤酵母
(
Pichia pastoris
)
裂殖酵母属
如非洲酒裂殖酵母(
Schizosaccharomyces pombe
)
汉逊酵母属
如多态汉逊酵母(
Hansenula polymorpha
)
其中酿酒酵母的遗传学和分子生物学研究最为详尽,但巴斯德毕赤酵母
表达外源基因最理想。
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