石油微生物中文资料-综合打印版
微生物采油是利用微生物的运动及其代谢物进行强化采油的技能
[1~3]。本文接纳从油田水中疏散出的菌种,以青海七个泉油田原
油为研究东西,进行了较详细的室内实验研究,目的是弄清所筛选
出的微生物对七个泉油田原油的作用及效果,以寻求提高该油田原
油采收率的新途径。
结论:
1 ,原油受微生物作用后,族组分和分子结构都产生变革。高碳数正
构烷烃降解成低碳数烷烃; 芳烃骨架不受影响,支链断裂;代谢产
物有有机酸、气体和酮、醚类物质。
2 ,原油受微生物作用后物性变革较大,粘度、凝点、蜡含量均低落。
3 ,微生物提高原油采收率是多种因素协同作用的结果。如短链有
机酸可与岩石矿物反响,增大低渗透地层的渗透率,气体可以增加
地层压力,产生的生物外貌活性物质可改变岩石外貌性质。
向廷生,何正国,佘跃惠等,微生物提高原油采收率的机理研
究,石油勘探与开发,1998,25(4):53-57
[摘要] 以地层微生物地化运动的活化作用为底子的提高石油
采收率生物技能, 在大港孔店油田做了先导性试验(2001~2004
年) 。微生物的活化作用是通过注水井循环导入充气水和增补含 N ,
P 的矿物盐而得到的。这项生物技能的使用引起地层微生物的活化,
这个活化首先是在注水井的近井底区域, 接着是在沿着水动力学
偏向一致的区域进行。第一阶段, 需氧烃降解微生物的活性增加,
导致地层水碳酸氢盐和乙酸盐含量的增加; 第二阶段, 在缺氧区域
甲烷产生菌被激活。本源 MEOR 先导性试验表明, 地层水中的微生
物指标与生产井的产量有关, 通过试验多采出 16000 余吨原油。
本源 MEOR (微生物提高原油采收率) 要领以地层本源微生物活性
作用为底子, 在注水中引入空气和磷酸盐以及含氮的矿物质。第一
阶段, 需氧的和兼性厌氧的烃氧化菌被激活, 由于重油的部门氧化,
形成乙醇、脂肪酸、生物外貌活性剂、CO2 、多糖和其他组分, 这
些物质一方面是原油释放剂, 另一方面用作厌氧微生物(包罗甲烷
产生菌) 激活剂。第二阶段, 甲烷产生菌在厌氧层被激活, 产生 CH4
溶于原油后, 就会增加原油的流动性, 进而提高石油采收率。在详
细视察大港油田孔二北断块本源微生物区系组成底子上, 于 2001
年 4 月开展激活本源微生物提高原油采收率先导试验, 在每年 4~
9 月间循环注入含氮、磷源的充气水; 到 2004 年底; 取得了良好
效果。
周玲革, 佘跃惠,冯庆贤, 激活地层本源微生物提高稠油采收
率, 石油天然气学报(江汉石油学院学报) ,2005,27(1):93-95
摘 要 用最大或然数(MPN) 微生物计数法测定油田深度为1. 0~
1. 5 m 地表土壤样品的甲烷氧化菌数量,结合气相色谱法测定土壤
中甲烷氧化菌消耗甲烷的速率,来阐发供试地域甲烷氧化菌的异常,
推断地下天然气藏的漫衍。甲烷氧化菌的数量与其活性具有正相关
性,但不具有明显的纪律特征。甲烷氧化菌的数量明显高于配景值。
供试油田土壤的湿度、p H 值和岩性对甲烷氧化菌的数量与活性影
响不明显。通过对油田20 个测点土壤中甲烷氧化菌数量及相关井
位的研究,结果表明甲烷氧化菌的数量可以作为指示天然气藏漫衍
的指标。试验油田东部及东南部为有利气勘探区。该要领作为天然
气勘探的一种帮助手段,具有快速、低本钱的优点。
在地层压力的驱动下,油气藏的轻烃气体连续地向地表作垂
直扩散和运移〔1〕。土壤中以轻烃气体作为其唯一碳源和能源的
专性微生物在油藏正上方的地表土壤中非常发育并形成微生物异
常。通过检测烃氧化菌的数量和活性,可以判断地表微生物异常,从
而指示地下油气藏的漫衍〔2〕。甲烷氧化菌属于一类特殊的烃氧
化菌群。它仅能利用C1 化合物,而不能利用糖类或其它有机物,具
有高度的专一性。进行选择性培养可以将甲烷氧化菌从其它细菌中
疏散出来。Hanson 等综述了甲基营养菌的生态及其在甲烷物质循
环中的作用〔3〕。甲烷新陈代谢的历程由Leadbet ter〔4〕首先
提出。已知微生物首先通过甲烷加氧酶活化甲烷,在有氧条件下生
成甲醇,进一步氧化可生成甲醛。甲醛可以被同化产生生物质或被
氧化成CO2 并产生能量。天然气中98 %以上是甲烷气,甲烷易于往
地表扩散,甲烷氧化菌的异常可以指示地下矿藏的漫衍。
1. 土壤样品的收罗及其处置惩罚
土壤样品采自位于江汉盆地边沿的湖北松滋油田,该油田
系刚开发不久的新油田,钻井数量较少。采样区域主要漫衍于农田
或菜园,在设计的测网和测线点上钻孔取样。野外丈量接纳卫星定
位仪定点,测网间距为500 ×500 m。收罗的土壤样品要包管不受污
染,确保所采样品是从所要求的深度采样,采样层必须为氧化带。由
于该油田地下水位较高,应该在地下水位上采样,所以深度一般为1.
2~1. 5m。样品应尽可能在10 ℃以下生存,带回实验室时后自然风
干,研细后过100 目筛。称20 g 置于120mL 的血清瓶中备用。
2. 甲烷氧化菌培养基组成
甲烷氧化菌培养基: KH2 PO4 1. 0 g ,Na2 HPO42. 9
g ,MgSO4 ·7H2O 1. 0 g ,KNO3 1. 0 g ,微量元素溶液10 mL ,琼
脂18 g ,蒸馏水990 mL ,p H 6. 8 。培养基配制后分装厌氧试管,
每管4. 5 mL ,用异丁基橡胶密封。
向廷生,周俊初,袁志华, 利用地表甲烷氧化菌异常勘探天然
气藏, 天然气产业,,2005:25 (3) :41~43
[摘要] 在地层压力的驱动下, 油气藏的轻烃气体连续地向地表作
垂直扩散和运移。土壤中以轻烃气体作为其唯一碳源和能源的专性
微生物在油藏正上方的地表土壤中非常发育并形成微生物异常。通
过检测甲烷氧化菌及烃氧化菌的数量和活性, 可以判断地表微生
物异常, 从而指示地下油气藏的漫衍。传统的阐发要领是接纳经典
的微生物疏散纯化技能, 操纵历程啰嗦, 且事情量大。因此研究新
的微生物疏散要领已成为微生物勘探技能推广应用的一定。收罗
0.4m和1.5m深度油田地表土壤样品, 探讨了差别的甲烷氧化菌疏
散要领; 通过实验疏散出了两株形态特异的专一性甲烷氧化菌, 为
甲烷氧化相关基因的克隆提供了质料。并且用气相色谱对甲烷氧化
菌活性进行了测定。
在地层压力的驱动下, 油气藏的轻烃气体连续地向地表作垂直扩
散和运移。土壤中以轻烃气体作为其唯一碳源和能源的专性微生物
在油藏正上方的地表土壤中非常发育并形成微生物异常。通过检测
烃氧化菌的数量和活性, 可以判断地表微生物异常, 从而指示地下
油气藏的漫衍。甲烷氧化菌属于一类特殊的烃氧化菌群。它仅能利
用C1 化合物, 而不能利用糖类或其他有机物, 具有高度的专一性。
进行选择性培养可以将甲烷氧化菌(MOB) 从其他细菌中疏散出来。
Hanson 等综述了甲基营养菌的生态及其在甲烷物质循环中的作用。
甲烷新陈代谢的历程由Leadbetter首先提出。已知微生物首先通过
甲烷加氧酶活化甲烷, 在有氧条件下生成甲醇, 进一步氧化可生成
甲醛。甲醛可以被同化产生生物质或被氧化成CO2 并产生能量。另
一类可利用C2 ~C5 轻烃作碳源的细菌在有微量烃类存在的情况中
即可生长, 这类细菌的专一性较差, 除利用烃类外, 也可利用多糖
和其他有机物。恒久在微量轻烃情况中生长的微生物在C2 ~C5 为
碳源的培养基中也可以迅速生长; 而在非轻烃情况中生长的微生
物在C2 ~C5 为碳源的培养基中需要一段适应期, 生长迟钝。利用
这一差别可以检测土壤中轻烃的品貌。C2 ~C5 烃氧化菌的异常可
指示地下油藏的漫衍。天然气中98%以上是甲烷气, 甲烷氧化菌的
异常可以指示地下气藏的漫衍。下面研究油田地表土壤甲烷氧化菌
的疏散判定及活性测定。
1 试验要领
1) 样品收罗 试验所用土样取自松滋油田, 采样按无菌操纵要求
进行, 采样深度分别为014m和115m。共收罗19个样品, 带回实验室
后于4℃低温生存。
2) 土样预处置惩罚 取50g土样于无菌操纵台晾干, 并破坏成细颗
粒状(近粉末状) 。
3) MOB的纯化 接纳液体10倍稀释疏散培养与固体10倍稀释滚管
疏散相结合的要领进行疏散,接纳固体斜面纯化疏散培养物。
4) MOB活性测定 称取20g土样参加到干热灭菌处置惩罚的血清瓶
中, 盖上软塞并向其中注入5ml甲烷, 盖上外盖于30℃恒温培养。
接纳气相色谱检测甲烷含量, 检测条件如下: 氢离子火焰检测器(F
ID) , 进样量0.2ml , 总流速40.8ml/min , 柱流速1.6ml/min, 柱
温35℃, H2 流速35ml/min, 尾吹流速30.5ml/min , 空气流速
240ml/min。
4) 固体斜面纯化培养的菌落形态视察 经过固体斜面纯化培养疏
散出两株MOB, 形态特征为:
①青色菌落, 类似于霉菌, 椭圆形, 个别很大, 100倍油镜可见细
胞核及处于双核状态的细胞; ②白色菌落, 培养基内部呈圆点状,
露于空气中类似于霉菌, 有纤维状菌丝体, 中间有隔阂微球菌, 二
连球菌, 链球菌, 低倍镜下呈短杆状, 链杆状。
1) 通过对土样进行差别的选择性培养及随后的疏散纯化事情, 得
到了两株形态特异的甲烷氧化菌, 是否属于新的种属仍有待于进