EPO工程细胞培养方法和反应器.pptx

【EPO工程细胞培养方法和反应器】 红细胞生成素（EPO）是一种关键的糖蛋白，对于红细胞的发育和成熟起到至关重要的调控作用。它在治疗肾衰竭引发的贫血、恶性肿瘤相关贫血、艾滋病及化疗引起的贫血等方面表现出显著疗效，并且安全性高。EPO的广泛应用促使科学家们开发出重组人红细胞生成素（rhEPO），其中最常用的工程细胞是CHO细胞，因为CHO细胞是生产重组糖蛋白的理想系统。 在大规模生产rhEPO时，使用微载体生物反应器可以提高细胞培养效率。微载体提供了一个较大的细胞附着表面，有利于细胞的增殖和产物分泌。培养基的选择是细胞培养的关键环节，主要有天然培养基、合成培养基和无血清培养基。无血清培养基由于避免了血清带来的污染风险、批次间差异以及降低了纯化难度，逐渐成为首选。 无血清培养基中需要添加各种补充因子来替代血清的功能，这些补充因子包括必需补充因子如胰岛素、转铁蛋白和亚硒酸钠，以及特殊补充因子如生长因子、激素和贴壁因子等。胰岛素对细胞生长和存活至关重要，可以促进RNA、蛋白质合成，抑制细胞凋亡；转铁蛋白则提供细胞所需的微量元素铁，同时具有生长因子性质；亚硒酸钠通过参与抗氧化机制，保护细胞免受自由基损伤。 在生产rhEPO的无血清培养基中，SFM-p培养液是一种不含牛血清白蛋白的专用培养基，由DMEM F12培养基与多种成分（如硒、乙醇胺、维生素、蛋白胨等）混合而成。然而，无血清培养基可能导致细胞凋亡的问题依然存在，可以通过添加ATA、锌离子、抗氧化剂和细胞因子等物质来缓解这一问题。 未来的无血清培养基发展趋势将倾向于使用非动物来源的材料，特别是植物提取物，以减少潜在的病毒污染风险。理想的新型无血清培养基将能够高温消毒，适用于多种细胞类型，实现全功能培养。 总结起来，EPO工程细胞的培养涉及细胞选择、培养基配方优化、生物反应器设计等多个方面，每个环节都对最终产品的质量和产量有着直接影响。随着科技的进步，无血清培养基和生物反应器技术的持续改进，rhEPO的生产效率和安全性将进一步提升。