疫苗研发技术路线PPT学习教案
以下是根据给定文件生成的知识点:
1. 质粒构建——分子克隆原理:质粒构建是指在质粒 vector 中插入目的基因,使其能够在宿主细胞中表达。质粒构建的原理是基于分子克隆技术,即通过限制酶 cleavage 和 ligase连接,将目的基因插入质粒 vector 中。
2. 质粒的复制:质粒的复制是指质粒在宿主细胞中的复制过程。在质粒构建过程中,质粒需要被复制,以便在宿主细胞中表达目的基因。
3. 目的基因的表达:目的基因的表达是指在宿主细胞中表达目的基因,产生相应的蛋白质。目的基因的表达是通过转录和翻译两个步骤来实现的。
4. 蛋白的纯化:蛋白的纯化是指从宿主细胞中分离纯化目的蛋白的过程。蛋白的纯化可以通过结合与镍柱、使用高浓度的咪唑组氨酸来实现。
5. IPTG诱导表达:IPTG(Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside)是lac operon 的诱导剂,能够诱导目的基因的表达。在质粒构建过程中,IPTG可用于诱导目的基因的表达。
6. 间接ELISA试验:ELISA(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay)是检测抗原抗体结合的方法。间接ELISA试验是指使用-secondary antibody检测抗原抗体结合的方法。
7. 免疫组化试验:免疫组化试验是使用抗体检测抗原的方法。在免疫组化试验中,抗体可以与抗原结合,从而检测抗原的存在。
8. Western blot试验:Western blot试验是检测蛋白质的方法。该试验可以检测蛋白质的分子量和相对表达水平。
9. DAB染色试验:DAB(Diaminobenzidine)是Western blot试验中的染色剂。DAB染色试验可以检测蛋白质的存在。
10. ECL发光试验:ECL(Enhanced Chemiluminescence)是Western blot试验中的发光试剂。ECL发光试验可以检测蛋白质的存在。
11. FITC荧光显微镜试验:FITC(Fluorescein isothiocyanate)是荧光染料。在荧光显微镜试验中,FITC可以与抗体结合,检测抗原的存在。
12. 淋巴细胞增殖试验:淋巴细胞增殖试验是检测淋巴细胞增殖的方法。在该试验中,可以检测淋巴细胞对抗原的响应。
13. MTS比色试验:MTS(3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide)是检测细胞活性的试剂。在MTS比色试验中,可以检测淋巴细胞的活性。
14. 行为学试验(水迷宫):行为学试验是检测动物行为的方法。在水迷宫试验中,可以检测动物的空间记忆和学习能力。
这些知识点涵盖了疫苗研发技术路线中的关键技术和方法,包括质粒构建、蛋白的纯化、ELISA试验、Western blot试验、免疫组化试验等。这些技术和方法对于疫苗研发和免疫学研究具有重要的意义。