高效液相色谱法（HPLC）是一种用于分离、鉴定和定量混合物中各组分的分析化学技术。本文讨论了采用高效液相色谱法测定小米中维生素E（Vitamin E, VE）含量的研究，该研究于1992年发表在西南农业大学学报上。
维生素E是一类重要的脂溶性维生素，包括α、β、γ和δ四种形式，具有抗氧化作用，对生物体具有重要的生理功能，如防止细胞膜的氧化破坏、保护机体免受自由基损伤等。小米作为一种重要的粮食作物，其维生素E含量的测定对于评估其营养价值具有重要意义。
在该研究中，研究者们基于中国农科院品种资源研究所提供的华北、东北10省市的1040个小米样品，通过高效液相色谱法对其中的维生素E含量进行定量分析。该方法首先需要配制标准溶液并制作标准曲线，进而将样品经过脱壳、磨细、混匀等前处理步骤后，加入特定的化学试剂进行皂化和萃取，然后通过HPLC仪进行分离和检测。
HPLC系统通常包括泵、进样器、色谱柱、检测器以及数据处理系统。在本研究中，使用的是Waters公司的201型HPLC设备，其配置包括u6k进样器、510HPLC泵、481型LC分光光度计、M680梯度控制仪和M730数据处理机。色谱柱为uBondapak C18，流动相为甲醇，检测波长设定在280nm，流速为0.9ml/min，保留时间为10.34min。
研究中指出，前处理过程中采用的回流皂化法虽然经典，但操作繁琐，耗时长，不适合处理大量样品。因此，研究者们改进了前处理方法，使用0.1mol/L盐酸的乙醇溶液分散样品，并在不回流的情况下进行皂化，此方法既快速又简便，适合大批量样品分析。
为了确保维生素E的稳定性和萃取效率，在皂化过程中加入了抗坏血酸作为抗氧化剂，同时控制提取温度不超过65℃。维生素E易溶于乙醇，因此采用正己烷作为萃取剂从乙醇溶液中萃取VE。研究显示，萃取时间至少为4分钟以确保萃取完全，从而得到准确的维生素E含量数据。
通过HPLC测定，本研究得到了小米中VE含量的线性关系和回收率数据，回收率在91.55%-95.30%之间，平均回收率达到93.16%。对1040份样品的分析表明，小米中VE含量存在一定的差异，最高含量为95.84ug/g，最低含量为11.79ug/g，平均含量为43.48ug/g。
该研究为通过高效液相色谱法测定小米中维生素E含量提供了详细的实验方法和操作流程，并证明了该方法在小米VE含量测定中的准确性和可靠性。这不仅为小米种质资源数据库的建立提供了重要数据，也为进一步研究小米中其他营养成分的定量分析奠定了基础。
