海参硫酸软骨素(Sea Cucumber Chondroitin Sulfate, SC-CHS)是一种存在于海参体壁中的酸性多糖,其主要成分为硫酸软骨素骨架和硫酸酯化L-岩藻糖支链。该成分属于类硫酸软骨素化合物,具有多方面的生理功效,包括抑制肿瘤生长、抗凝血和抗胃溃疡等活性。由于海参硫酸软骨素的生理价值和潜在的市场需求,对其的制备和应用研究日益增加。为了促进其在功能食品开发中的应用,快速简便的测定方法显得尤为重要。 次甲基蓝显色法定量海参硫酸软骨素的方法是基于次甲基蓝与阴离子聚合物能够形成超分子复合物的原理。在此方法中,首先提取不同种类的海参(例如仿刺参、海地瓜、梅花参、美国肉参和北大西洋瓜参)中的海参硫酸软骨素作为标准物质。随后,通过将1.00ml适宜浓度的海参硫酸软骨素水溶液与8.00ml的5mmol/L pH7.0的磷酸氢二钾-磷酸二氢钾缓冲液以及1.00ml浓度为0.18mg/ml的次甲基蓝水溶液混合。混合后立即测定其在545nm波长处的吸光值。这个吸光值可以代入事先建立的标准曲线中,从而计算得出样品中海参硫酸软骨素的浓度。 此方法不仅操作简便,而且检出限为1.6-1.8μg/ml,定量限为5.2-6.2μg/ml,具备较高的精密度和回收率。该次甲基蓝显色法的建立,实现了海参硫酸软骨素的快速定量测定,对海参硫酸软骨素的制备、研究和应用具有重要的推动作用。目前,海参硫酸软骨素的测定方法包括硫酸-咔唑法、Elson-Morgan法、酶解-高效液相色谱法等,但这些方法往往步骤繁琐,且并未广泛适用于海参硫酸软骨素的测定。 在进一步的研究中,科学家们尝试利用次甲基蓝与阴离子聚合物形成超分子复合物的特性,探索出了使用比色法测定海参硫酸软骨素的新途径。比色法作为一种简便的定性和定量分析手段,在实验室中得到了广泛的应用。其基本原理是利用溶液颜色变化的深浅与被测物质浓度之间的关系来进行检测。在本研究中,选择合适的次甲基蓝浓度以及pH值为7.0的缓冲溶液是为了确保测定过程的稳定性和准确性。 比色法的简便操作、快速结果和无需昂贵设备等优点,使其在海参硫酸软骨素的定量分析中具有很好的应用前景。此方法可作为海参硫酸软骨素含量测定的标准方法之一,为海参的深加工以及相关产品的质量控制提供技术支撑。不仅如此,随着海参硫酸软骨素的生理功效和市场价值被进一步发掘,该测定方法的研究和应用也将不断完善和推广。
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