蛇神经毒素在毕赤酵母中的分泌表达及其分离纯化 (2005年)

文中主要研究了毕赤酵母基因工程菌的构建及其发酵表达产物蛇神经毒素的分离纯化条件。蛇神经毒素编码基因由本实验室设计、合成，并重组构建成表达质粒pPIC9k-hPK。经电穿孔将该质粒转化毕赤酵母GS115(His-Mut+)，筛选His+Muts型菌株，经诱导表达，产物进行SDS-PAGE电泳鉴定，相对分子质量与理论值一致，目标蛋白经小试发酵产量可达350 mg/L。利用超滤、离子交换树脂及分子筛分离纯化，产物经高效液相色谱(HPLC)分析纯度达92％。