论文研究 - 基于DNA-AuNPs和双酶双信号扩增的多甲基化基因座分析电化学生物传感器

DNA甲基化在各种生物学事件中都起着重要作用，其精确测定对于癌症的预后和治疗至关重要。 在这里，我们提出了一种超灵敏的电化学生物传感器，用于通过锚定金纳米颗粒（DNA-AuNPs）和双酶双信号放大的DNA定量分析DNA序列中的多个甲基化基因座。 在生物传感器的DNA-AuNPs捕获了目标DNA后，甲基CpG结合蛋白MeCP2可以特异性结合到双链DNA中的甲基化位置。 继而，葡萄糖氧化酶（GOD）和辣根（HRP）共标记的抗体捕获了His标记的MeCP2，这导致底物的级联酶催化产生可检测的电化学信号。 这两种策略，包括高含量的DNA-AuNPs以及相关的双酶催化，都极大地提高了生物传感器的灵敏度。 响应电流随着甲基化位点数目的增加而升高，因此通过检测相应的电流信号可以鉴定出多个甲基化的DNA。 该方法可以检测到低至0.1 fM的甲基化靶标，并显示10-15 M至10-7 M的宽线性范围。此外，还验证了该生物传感器的长期稳定性和可重复性。 所制备的电化学免疫传感器通过双酶标记过程表现出超敏性，可用于低浓度DNA甲基化的检测。