本文主要介绍了如何使用液相色谱-质谱联用仪(LC-MS)检测猪肉中的瘦肉精(β-受体激动剂)残留,以及固相萃取(SPE)作为样品预处理技术在食品安全检测中的应用。
瘦肉精是一类能够促进畜禽蛋白质合成和肌肉生长的药物,但过度使用会导致动物体内残留,对消费者健康构成威胁。近年来,由于瘦肉精滥用引发的中毒事件促使各国加强了对其检测的法规制定。因此,建立高效、准确的检测方法至关重要。
固相萃取是净化和富集样品中瘦肉精的关键步骤,主要包括预平衡、上样、柱淋洗和洗脱四个阶段。这一过程利用反相保留机制,通过选择不同的溶剂来分离目标物质。例如,先用强洗脱溶剂(如甲醇)和弱洗脱溶剂(如水)交替润湿SPE柱,然后用弱洗脱溶剂溶解样品并加载到柱上,接着用较弱的溶剂洗去基质成分,最后用适当的溶剂洗脱目标物。
LC-MS分析则采用四极杆-飞行时间质谱仪(Q-TOF-MS),配合电喷雾(ESI)离子源,对预处理后的样品进行定性分析。电喷雾源通过高电压使含离子的流动相雾化,并在电场作用下形成气态离子进入飞行时间质量分析器。四极杆用于筛选不同质荷比的离子,飞行时间质量分析器则通过测量离子的飞行时间确定其质量,实现对瘦肉精类化合物的精确分子式识别。
实验中,样品首先通过全扫描模式获取瘦肉精的精确分子式,随后采用目标离子二级碎裂模式解析化合物结构。实验设备包括Agilent 1290 HPLC和6530 Q-TOF-MS等,采用C18反相柱进行色谱分离,流动相为甲酸水溶液和纯甲醇的梯度洗脱。
实验步骤包括:1) 样品提取,通过匀浆机和离心机提取猪肉中的瘦肉精;2) 固相萃取,使用C18小柱进行净化和浓缩;3) LC/MS分析,通过软件控制二元泵模块进行流动相冲洗,然后进行样品分析。
瘦肉精的检测涉及复杂样品前处理技术和高级分析仪器的使用,是食品安全监控的重要环节。通过液相色谱-质谱联用技术,可以有效检测和鉴别猪肉中的瘦肉精残留,保障消费者的食品安全。