(2). 与核酸结合的蛋白质及 RNA 等杂质的去除;
主要利用 DNA 与蛋白、多糖性质不同,加入离子变性剂、去污剂使其变性解聚;
CTAB: 十六烷基三甲基溴化铵,可溶解细胞膜,,在高盐溶液中( 0.7mol/L NaCl )
与 DNA 结合形成复合物并呈溶解状态,但当浓度降低到一定程度( 0.3mol/L
NaCl )时, DNA 即从溶液中沉淀,通过离心可将 DNA-CTAB 复合物与多糖与
蛋白质分开。
SDS: 十二烷基硫酸钠,可使蛋白质变性,核蛋白解聚,使 DNA 游离出来,
再根据 DNA 和蛋白质在有机溶剂中溶解度差异,用苯酚 - 氯仿抽提蛋白。
苯酚 - 氯仿 : 对蛋白质具有极强的变性作用,而对 DNA 无影响。
RNA 杂质 : 用不含 DNA 酶的 RNA 酶去除。