肺结核是一种由结核分枝杆菌引起的慢性传染病,是全球性的公共卫生问题。据文献报道,每年全球有大约150万人因结核病死亡,结核病的致病菌为结核分枝杆菌,主要通过呼吸道传播。在我国,现有结核患者450万例,每年病死近20万人。在众多器官中,肺结核是最常见的。目前结核病的诊断主要依靠症状、体征、痰涂片及培养、胸部影像检查、结核菌素纯蛋白衍生物(PPD)试验等手段。随着分子生物学技术的发展,结核抗体测定技术在临床上越来越广泛地应用于结核病的辅助诊断。
蛋白芯片技术是近年来发展起来的一种新型生物分析技术,能够同时检测多种生物分子,具有高通量、高灵敏度和高特异性的优点。本研究中使用的结核蛋白芯片,是基于三种不同的抗原(脂阿拉伯甘露糖LAM、16000、38000)来检测结核分枝杆菌感染情况的技术。研究结果显示,蛋白芯片检测在肺结核中的阳性率为68%,在结核性胸膜炎中的阳性率为11%,在非结核性肺部疾病组中的阳性率为10%。蛋白芯片对肺结核病的敏感性为68%,特异性为90%。
蛋白芯片检测方法是将待测生物分子,如蛋白质、DNA等固定于芯片表面,通过生物化学反应实现对目标分子的特异性识别,再通过相应的仪器读取信号,完成分析检测。本研究使用的结核蛋白芯片,通过测定患者血清中特定的抗体(LAM、16000、38000、IgG)来诊断结核病。若这些抗体中任一指标为阳性,则确定为结核分枝杆菌感染;若均为阴性,则提示未感染结核分枝杆菌。
在本研究中,所使用的结核分枝杆菌IgG抗体检测试剂盒和PB-X2生物识别仪,分别由南京大渊生物技术工程有限责任公司提供。仪器及试剂的选择对于实验结果的准确性至关重要。芯片结果分析由相应的生物识别仪进行,仪器设置的参数可以自动进行结果判别。
研究中也指出,蛋白芯片检测方法虽然具有较高的特异性和敏感性,但其检测结果会受到患者免疫状态的影响。极少数重症结核患者,由于免疫功能极度低下,可能出现无法检出抗体的情况。
此外,研究还讨论了LAM、16000、38000这三种抗原在结核病诊断中的重要性。LAM是结核分枝杆菌细胞壁的重要组成部分,含量明显高于其他分枝杆菌,是诊断结核病的重要标志之一。38000蛋白抗原是结核分枝杆菌复合群特异性蛋白,在结核杆菌培养滤液中的浓度远高于其他相关分枝杆菌,是结核分枝杆菌分泌的抗原之一,其抗体检测是诊断结核病的有效指标。16000蛋白抗原是结核分枝杆菌复合群特异性抗原,与其他常见的非结核分枝杆菌没有血清交叉反应,因此,16000抗原抗体对结核分枝杆菌感染具有特异性的诊断价值。
蛋白芯片检测技术在结核病的诊断和鉴别诊断中发挥着重要的作用,尤其是结合临床其他诊断方法,可提高肺结核的诊断准确性。然而,需要强调的是,任何检测技术都不能单独作为诊断结核病的唯一标准,应结合患者的临床表现和其他辅助检查结果综合判断。随着生物芯片技术的进一步发展和完善,未来有望提供更加准确、快速的结核病诊断方案。