ssr分子标记原理.pdf
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"SSR分子标记原理" SSR(Simple Sequence Repeat)分子标记原理是基于微卫星DNA的多态性来进行遗传分析的方法。微卫星DNA又称简单重复序列,指的是基因组中由1~6个核苷酸组成的基本单位重复多次构成的一段DNA。微卫星DNA广泛分布于基因组的不同位置,长度一般在200bp以下。 SSR标记的原理是基于微卫星中重复单位的数目存在高度变异,这些变异表现为微卫星数目的整倍性变异或重复单位序列中的序列有可能不完全相同,因而造成多个位点的多态性。如果能够将这些变异揭示出来,就能发现不同的SSR在不同的种甚至不同个体间的多态性。 SSR标记又称为sequence tagged microsatellite site, 简写为STMS,是目前最常用的微卫星标记之一。由于基因组中某一特定的微卫星的侧翼序列通常都是保守性较强的单一序列,因而可以将微卫星侧翼的DNA片段克隆、测序,然后根据微卫星的侧翼序列就可以人工合成引物进行PCR扩增,从而将单个微卫星位点扩增出来。 RAPD技术是建立在PCR(Polymerase Chain Reaction)基础之上的一种可对整个未知序列的基因组进行多态性分析的分子技术。其以基因组DNA为模板,以单个人工合成的随机多态核苷酸序列(通常为10个碱基对)为引物,在热稳定的DNA聚合酶(Taq酶)作用下,进行PCR扩增。扩增产物经琼脂糖或聚丙烯酰胺电泳分离、溴化乙锭染色后,在紫外透视仪上检测多态性。扩增产物的多态性反映了基因组的多态性。 在生物的基因组中,特别是高等生物的基因组中含有大量的重复序列,根据重复序列在基因组中的分布形式可将其分为串联重复序列和散布重复序列。其中,串联重复序列是由相关的重复单位首位相连、成串排列而成的。微卫星DNA又叫简单重复序列,指的是基因组中由1~6个核苷酸组成的基本单位重复多次构成的一段DNA,广泛分布于基因组的不同位置,长度一般在200bp以下。 研究表明,微卫星在真核生物的基因组中的含量非常丰富,而且常常是随机分布于核DNA中。在植物中通过对拟南芥、玉米、水稻、小麦等的研究表明微卫星在植物中也很丰富,均匀分布于整个植物基因组中,但不同植物中微卫星出现的频率变化是非常大的。 SSR标记的应用非常广泛,包括遗传分析、基因表达分析、基因_clone_mapping等。该方法的优点是可以快速、准确地检测微卫星的多态性,从而提供了一个有效的工具来研究基因组的多态性。
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