安捷伦HPLC1260是一款高效液相色谱仪,广泛应用于化学、生物、制药等领域的分析检测。其操作流程分为多个步骤,包括了解仪器组成、操作前准备、开机及关机、工作站使用以及数据分析。以下是详细的知识点说明:
**仪器组成**
安捷伦1260HPLC系统主要由以下组件构成:
1. **主体**:包含四元泵、自动进样器、柱温箱和二极管阵列检测器。
2. **附件**:包括电脑、显示器和打印机等设备。
**四元泵**:用于混合和输送四种不同的流动相,根据实验需求调整比例,实现梯度洗脱。
**自动进样器**:自动装载样本并精确控制进样量,减少人为误差。
**柱温箱**:保持色谱柱温度恒定,影响分离效果。
**二极管阵列检测器**:提供全波长检测,能同时记录所有吸收峰,提高检测的灵敏度和准确性。
**操作前准备**
1. **流动相选择**:选择合适的单组分或多组分溶剂,根据样品性质调整极性。常用溶剂如甲醇、水、乙腈等,需为HPLC级,水需超纯。
2. **流动相过滤**:使用0.45μm滤膜过滤,去除杂质,保护系统和色谱柱。
3. **流动相超声与脱气**:超声30分钟去除气泡,减少基线噪声;四元泵内的脱气机进一步处理。
4. **流动相冷却**:避免超声后的溶剂过热影响系统稳定性。
**开机及关机**
1. **开机**:先开计算机,再开主机电源,联机进入工作站,排气、调节流速和比例,打开检测器,跑基线,然后清洗进样针和管路。
2. **关机**:使用特定的清洗程序,冲洗柱子和系统,保存方法和设置,关闭各模块电源,断电,并记录使用情况。
**工作站使用**
1. **进入工作站**:启动软件,进入主界面。
2. **方法设置**:编辑各模块参数,如泵的压力、进样器的速度、检测器的灵敏度等。
3. **运行分析**:设定好方法后,进行样品命名,进样检测,保存数据。
**数据分析**:在工作站中对收集到的数据进行处理,包括峰识别、定量和定性分析,生成报告。
总体来说,安捷伦HPLC1260的操作涉及多个环节,每个环节都需要细心操作,确保实验的准确性和重复性。良好的操作习惯和对仪器的深入了解是高效利用HPLC的关键。