实验六 高效液相色谱法测定牛奶中的四环素类抗生素残留
姓名 : 班级 :食品科学
学号 :
一 目的要求
1 通过实验强化对高效液相色谱法分离及定量分析原理的理解 ;
2 直观了解流动相组成在高效液相色谱中对分析物保留时间和分离度的影响 ;
3 直观了解高效液相色谱仪的结构 ;
4 掌握利用外标法进行定量分析的方法。
二 实验原理
在畜牧生产过程中 ,将一些抗菌素作为添加剂以较低浓度加入到饲料中 ,可使导
致动物生产效率下降的支原体病等慢性传染病得到有效抑制 ,因而能够促进动物生
长。但是 ,这种做法常导致在动物性食品中的抗生素残留 ,人类食用后导致耐药菌群
的产生 ,将会产生一系列严重后果。四环素类抗生素就是被经常使用的一类抗生素 ,
其中四环素 (Tetracycline, TC 、土霉素 (Oxytetracycline, OTC 和金霉素
(Chlortetracycline, CTC 就是该类抗生素中的三种 ,是提取自链霉菌属培养液的广谱
抗生素 ,结构如下 :
我国和欧盟规定其在牛奶中的最大残留限量为 0.1 mg/kg 。
三种抗生素在酸性条件下稳定 ,易与蛋白质发生强烈结合 ,且易与金属离子形成
鳌合物。在乙二胺四乙酸二钠 (EDTA 存在条件下 ,用草酸甲醇提取可获得较高回收
率。
三种抗生素的共有结构均可在 C 18 柱上产生保留 ,OTC 和 CTC 均与 TC 仅差
一个取代基 ,采用适当的流动相 ,以反相色谱方式可将三者有效分离。三者具有共同