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常规PCR实验PPT课件.pptx
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掌握:
1
、
PCR
的基本操作方法。
2
、琼脂糖凝胶
电泳检测
DNA
的基本原理和
方
法。
理解:
1
、
PCR
仪的使用方法。
了解:
1
、
PCR
体外扩增的原
理及其引物设计原
则。
2
、扩增过程中各因
素对扩增结果的影
响。
教学目的:
第
1
页
/
共
34
页
1
、
P
CR
反应体系的建
立。
2
、琼脂糖凝胶电泳检
测
PCR
产物。
教学重点:
教学难点:
1
、
PCR
反应程序的设计方
法。
第
2
页
/
共
34
页
一、基本原理
聚合酶链式反
应(
Polymerase Chain
Reaction
,
PCR
):
体外
DNA
酶促扩增技术,能
特异高效地在体外
扩增
目的
DNA
片段。
第
3
页
/
共
34
页
PCR
反应的基本步骤
变性
94˚C
双链
DNA
模
板被加热变性
成两条单链
退火
45~60 ˚C
(
Tm-5˚C
)
寡聚核苷酸引物按
碱基互补配对原则
与单链模板
DN
A
特异结合
延伸
72
˚
C
DNA
聚合酶
作用
下,以引物为起
始,合成与模板
DNA
互补的
新链
第
4
页
/
共
34
页
Cycle 2
5
5
5
5
5
Primer
1
5
Primer
2
Cycle 1
5
5
T
emplate DNA
PCR
技术的工作原
理
5
5
5
5
5
5
5
5
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