【知识点详解】
1. **微生物计数方法**：在生物学实验中，常用的方法有稀释涂布平板法和直接计数法。稀释涂布平板法适用于测定样品中活菌的数量，因为它能确保每个菌落来源于单一的活菌，而直接计数法则包括显微镜直接计数和流式细胞术等，它不仅包含活菌，也包含死菌。
2. **选择性培养基**：选择出分解尿素的细菌的培养基应该包含尿素作为唯一氮源，因为尿素分解菌能够利用尿素作为氮源生长。选项中A和D含有牛肉膏和蛋白胨，这些都是氮源，不利于筛选尿素分解菌；B选项缺少尿素，C选项符合条件。
3. **实验操作的纯净性**：获得纯化的尿素分解菌的单菌落，最重要的是避免杂菌污染。涂布器的灭菌、接种操作的无菌环境以及选择合适的培养基都是关键因素。其中，涂布器未在酒精灯外焰上灼烧灭菌可能导致杂菌污染，影响单菌落的形成。
4. **微生物培养注意事项**：微生物培养前，需要对培养基进行灭菌，但微生物通常不需要灭菌，而是采用消毒。酵母菌发酵产生的酒精对其他微生物有抑制作用。选择培养尿素分解菌的培养基应以尿素为唯一氮源，这样只有能分解尿素的菌才能生存。
5. **尿素分解菌特性**：尿素分解菌能够分解尿素，是因为它们能产生尿酶，而非蛋白酶。环境中的尿素不会诱导细菌产生新的特性，而是筛选出已有该特性的菌株。以尿素为唯一氮源且添加酸碱缓冲剂的培养基，如果含有尿素分解菌，会使酚红指示剂变红，因为尿素分解产生的氨会改变pH。
6. **生物技术实践检验**：果酒制作中，检验酒精用硫酸和重铬酸钾，需先加发酵液后加试剂。检验培养基污染的方法是对比接种和未接种的培养基生长情况。加入酚红的尿素培养基可鉴定尿素分解菌。胡萝卜素的纯度通过纸层析法确定。
7. **实验操作步骤**：正确的操作流程为土壤取样→称取一定量土壤加入无菌水→稀释→涂布平板。一般从稀释液中取样涂布，而不是直接从土壤中。
8. **尿素作为氮源**：尿素分解菌不能固氮，所以培养基需提供化合态氮，即尿素。培养基中尿素的浓度适当，过多或过少都不利于细菌生长。
9. **实验细节**：培养基倒置可防止水分蒸发和杂菌污染；同一稀释度至少涂布三个平板是为了保证结果的可靠性；高稀释度下形成的单菌落不一定遗传信息相同，可能由两个或多个细胞共同形成；无菌培养基无菌落生长说明培养基无杂菌污染。
10. **选择性培养基的应用**：以尿素为唯一氮源的培养基可分离尿素分解菌，青霉素抑制细菌，10%酚抑制细菌和霉菌，所以分别能分离出尿素分解菌、霉菌和放线菌。
11. **菌落计数分析**：3号试管菌落稀释倍数为10^5倍，4号与5号之间的菌落数关系不符合10倍规律，5号试管数据不能直接得出每克土壤中的菌株数，实验方法统计值通常高于实际活菌数，因为它包括了不可区分的菌落。
12. **降解原油菌株筛选**：筛选高效降解原油的菌株，需使用含原油的培养基，通过逐步筛选并测试其降解能力，最终得到目标菌株。
以上是对“土壤中分解尿素细菌的分离与计数”这一主题的详细知识点解析，涉及微生物计数方法、选择性培养基的配制、实验操作规范、微生物培养注意事项以及微生物筛选策略等多个方面。
