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《-基因工程的基本操作程序》PPT课件.ppt
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1.2
基因工程的基本操作程序
1
.
1
、目的基因的获取
2
、基因表达载体的构建
3
、将目的基因导入受体细胞
4
、目的基因的检测与鉴定
基因工程基本操作的四个步骤
有了目的基因,我们才
能赋予一种生物以另一
种生物的遗传特性。
使目的基因在受体细胞
中稳定存在,并可进行
遗传、表达和发挥作用
载体进入受体细胞稳定
表达,才能实现一种生
物的基因在另一种生物
中的转化。
才能确定目的基因是否
真正在受体细胞中稳定
遗传和正确表达。
2
.
一、目的基因的获取
(
一
)
、目的基因主要是
______________________
编码蛋白质的结构基因
请举出三个以上的例子
(二)、获取目的基因的常用方法有哪些
?
1
、从基因文库中获取
2
、利用
PCR
技术扩增
3
、人工合成
3
.
一、目的基因的获取
(一)从基因文库中直接获取
1.
基因文库:
2.
基因文库的分类
:
按外源
DNA
片段的来源分类
种
类
基因组
DNA
文库:
含有一种生物的
全部
基因
部分基因文库:
只包含了一种生物的
部分
基因,
如:
cDNA
文库
3.
基因文库的目的
为了在不知目的基因序列的情况下,便于获得所需的
目的基因。
4.
获取目的基因的根据
:
4
.
提取某种生物的全部
DNA
用适当的限制酶切
一定大小的
DNA
片段
将
DNA
片段与载体连接
导入受体菌中储存
基因组文库
5.
基因文库的构建方法之一
(
1
)直接分离法
(
鸟枪法
)
5
.
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