嘌呤甲基化酶(dam ) ,甲基化酶在 5’ GATC3’序列中的腺嘌呤 N6 位引入甲基 .
② DNA 胞嘧啶甲基化酶(dcm ) ,甲基化酶在 5’ CCAGG3’或 5’ CCTGG3’序
列中的胞嘧啶 C5 位上引入甲基, 受其影响的酶有 EcoR II 等 .Zzz6ZB2Ltk
**3、诱发星号活性产生的原因:○ 1 高甘油含量》 5%; ○ 2 内切酶用量过
大; ○ 3 低离子强度; ○ 4 高 pH ;dvzfvkwMI1
○ 5 含有有机溶剂,如乙醇; ○ 6Mn/Cu/Zn 等非 Mg 二价阳离子存在。
4、 DNA 聚合酶 I 的基本性质:5‘→ 3‘ DNA 聚合酶活性 ; 5‘→ 3‘的
核酸外切酶活性 ; 3‘→ 5‘的核酸外切酶活性。 切口平移法 :目前实验室中
最常用的一种脱氧核糖核酸探针标记法。rqyn14ZNXI
Klenow 酶的基本用途:1】补平由核酸内切酶产生的 5’粘性末端 ; 2】 DNA
片段的同位素末端标记;EmxvxOtOco
3】 cDNA 第二链的合成; 4】双脱氧末端终止法测定 DNA 序列
Klenow 片段:保留 5→ 3’聚合酶活性和 3→ 5‘外切酶活性 ;丧失了 5→
3‘的核酸外切酶活性。SixE2yXPq5
T4-DNA 聚合酶的基本用途:1】切平由核酸内切酶产生的 3’粘性末端 ; 2】
DNA 片段的同位素末端标记 6ewMyirQFL
T4-DNA 酶的基本特性:1】 5’→ 3’的 DNA 聚合酶活性和 3’→ 5’的核
酸外切酶活性;kavU42VRUs
2】在无 dNTP 时,可以从任何 3’ -OH 端外切; 3】只有一种 dNTP 时,外
切至互补核苷酸暴露时停止; 4】在四种 dNTP 均存在时,聚合活性占主导地位; 5
】外切酶活性比 Klenow 酶高 100~1000 倍。y6v3ALoS89
反转录酶:依赖于 RNA 的 DNA 聚合酶
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