动物肝脏中DNA的提取及检测实验报告.doc
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动物肝脏中 DNA 的提取及检测实验报告 一、前言 脱氧核糖核酸(DNA),又称去氧核糖核酸,是脱氧核糖核酸染色体的主要化学成分,同时也是组成基因的材料。有时也被称为“遗传微粒”,原因是在繁殖过程中,父代会把它们自己 DNA 的一部分复制传递到子代中,从而完成性状的传播。 二、DNA 的结构 DNA 的结构一般可划分为一级结构、二级结构、三级结构和四级结构四个水平。DNA 是一种长链聚合物,组成单位为四种脱氧核苷酸,即腺嘌呤脱氧核苷酸(dAMP 脱氧腺苷)、胸腺嘧啶脱氧核苷酸(dTMP 脱氧胸苷)、胞嘧啶脱氧核苷酸(dCMP 脱氧胞苷)、鸟嘌呤脱氧核苷酸(dGMP 脱氧鸟苷)。而脱氧核糖(五碳糖)与磷酸分子借由酯键相连,组成其长链骨架,排列在外侧,四种碱基排列在侧。 每个糖分子都与四种碱基里的其中一种相连,这些碱基沿着 DNA 长链所排列而成的序列,可组成遗传密码,指导蛋白质的合成。读取密码的过程称为转录,是以 DNA 双链中的一条单链为模板转录出一段称为 mRNA(信使 RNA)的核酸分子。 三、DNA 的提取 浓盐法从动物组织中提取 DNA 核酸和蛋白质在生物体中常以核蛋白(DNP/RNP)的形式存在,其中 DNP 能溶于水及高浓度盐溶液,但在 0.14 M 的盐溶液中溶解度很低,而 RNP 则可溶于低盐溶液,因此可利用不同浓度的 NaCl溶液将其从样品中分别抽提出来。 将抽提得到的 DNP 用 SDS 处理可将其分离 DNA 和蛋白质,用氯仿-异戊醇将蛋白质沉淀除去可得 DNA 上清,加入冷乙醇即可将其呈纤维状析出。 四、肝脏细胞 肝脏是由肝细胞组成,肝细胞极小,肉眼看不到,必须通过显微镜才能看到。人肝约有 25 亿个肝细胞,5000 个肝细胞组成一个肝小叶,因此人肝的肝小叶总数约有 50 万个。肝细胞为多角形,直径约为 20-30μm,不同的生理条件下大小有差异,如饥饿时肝细胞体积变大。 五、实验步骤 1. 取材:从动物肝脏组织中取材,进行 DNA 提取。 2. 提取:使用浓盐法从动物组织中提取 DNA 核酸和蛋白质。 3. 分离:用 SDS 处理将 DNP 分离 DNA 和蛋白质,用氯仿-异戊醇将蛋白质沉淀除去可得 DNA 上清。 4.析出:加入冷乙醇即可将其呈纤维状析出。 六、结论 本实验报告介绍了动物肝脏中 DNA 的提取及检测实验步骤,包括 DNA 的结构、提取方法、实验步骤等内容,为研究DNA 的结构和功能提供了重要的理论基础和实验方法。
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