### 沉淀反应知识点详解
#### 一、亲和层析柱的选择
- **选项解析**:
- **A. 琼脂糖**:适用于多种亲和层析,因其孔隙结构适合不同分子大小的蛋白质。
- **B. 琼脂糖珠4B**:具有更稳定的物理性质,适用于较大分子量的蛋白质。
- **C. 聚乙二醇**:不常用于亲和层析柱制备。
- **D. 硫酸铵**:用于蛋白质的盐析而非亲和层析。
- **E. 聚丙烯酰胺**:可用于凝胶电泳,但不是亲和层析的首选材料。
- **正确答案**:B. 琼脂糖珠4B
#### 二、增加沉淀反应的浊度选择
- **选项解析**:
- **A. 琼脂糖**:增加介质的粘度,间接影响沉淀的形成。
- **B. 琼脂糖珠4B**:同样可以增加介质粘度。
- **C. 聚乙二醇**:常用作沉淀剂,通过降低溶剂介电常数来促进沉淀反应的发生。
- **D. 硫酸铵**:常用作盐析剂,通过改变溶液的离子强度促进沉淀。
- **E. 聚丙烯酰胺**:不直接用于增加沉淀反应的浊度。
- **正确答案**:C. 聚乙二醇
#### 三、双向免疫扩散试验
- **概念**:双向免疫扩散试验是一种利用抗原抗体在凝胶中的自由扩散来进行检测的技术。
- **选项解析**:
- **A. 琼脂糖**:最常用的凝胶基质。
- **B. 琼脂糖珠4B**:不适合用于双向免疫扩散试验。
- **C. 聚乙二醇**:不是凝胶基质。
- **D. 硫酸铵**:不是凝胶基质。
- **E. 聚丙烯酰胺**:不是常用的双向免疫扩散试验基质。
- **正确答案**:A. 琼脂糖
#### 四、抗体的纯度鉴定支持物选择
- **选项解析**:
- **A. 琼脂糖**:适用于中低分子量的蛋白质纯度鉴定。
- **B. 琼脂糖珠4B**:不适合用于电泳。
- **C. 聚乙二醇**:不是凝胶电泳的支持物。
- **D. 硫酸铵**:不是凝胶电泳的支持物。
- **E. 聚丙烯酰胺**:适用于高分辨率的蛋白质纯度鉴定。
- **正确答案**:E. 聚丙烯酰胺
#### 五、单向扩散法
- **定义**:单向扩散法是一种简单的沉淀反应技术,用于测定样品中抗原的浓度。
- **原理**:待测抗原从局部向含有抗体的凝胶内自由扩散,抗原抗体特异性结合,形成白色沉淀环,环的大小与抗原的浓度成正相关。
#### 六、对流免疫电泳
- **定义**:对流免疫电泳是一种结合了双向免疫扩散和电泳的技术。
- **特点**:在直流电场的作用下加速定向扩散,提高检测速度和灵敏度。
#### 七、双向扩散试验
- **定义**:双向扩散试验是将抗原和抗体溶液分别加入同一凝胶板的不同孔内,让两者在凝胶中相互扩散并在比例适当处形成白色沉淀。
- **应用场景**:用于检测未知抗原的存在及其浓度。
#### 八、免疫电泳
- **定义**:免疫电泳是一种将区带电泳和双向免疫扩散相结合的免疫化学分析技术。
- **应用场景**:用于抗原成分的分析和鉴定。
#### 九、火箭免疫电泳
- **定义**:火箭免疫电泳是一种将单向免疫扩散与电泳相结合的技术,用于快速测定抗原的浓度。
- **应用场景**:适用于需要快速定量检测的情况。
#### 十、放射自显影技术
- **定义**:放射自显影技术利用放射性同位素标记的抗原或抗体进行检测的技术。
- **应用场景**:主要用于蛋白质定位的研究。
#### 十一、脑脊液中寡克隆蛋白检测
- **定义**:寡克隆蛋白检测用于诊断中枢神经系统疾病。
- **应用场景**:常用于多发性硬化症的辅助诊断。
#### 十二、抗原和抗体成分分析
- **定义**:抗原和抗体成分分析用于确定混合物中各成分的种类和数量。
- **应用场景**:免疫电泳和免疫固定电泳均可用于此目的。
#### 十三、M蛋白鉴定
- **定义**:M蛋白是指单克隆免疫球蛋白,其鉴定对于某些血液病的诊断非常重要。
- **应用场景**:免疫电泳和免疫固定电泳都是常用的技术。
#### 十四、沉淀反应的分类
- **定义**:沉淀反应是一种基于抗原抗体特异性结合形成的沉淀物的技术。
- **分类**:火箭电泳属于沉淀反应的一种。
#### 十五、沉淀反应的主要影响因素
- **因素**:包括溶液的pH值、离子浓度、抗体质量及抗原抗体的比例。
- **关键因素**:抗原抗体的比例是最主要的影响因素。
#### 十六、沉淀反应的带现象
- **定义**:抗原抗体分子比例合适的范围称为等价带,比例不合适则会出现前带或后带现象。
#### 十七、免疫比浊法
- **定义**:免疫比浊法是一种基于抗原抗体反应后形成的复合物浊度变化来定量测定抗原或抗体的方法。
- **基本原则**:保证抗体过量,使抗原完全被结合。
#### 十八、免疫沉淀法
- **定义**:免疫沉淀法是一种常用的抗原定量技术。
- **常用方法**:免疫比浊法因其简便快捷而广泛应用。
#### 十九、影响免疫浊度法测定的因素
- **因素**:包括抗原抗体的比例、抗体的质量、抗原抗体反应的溶液以及增浊剂的应用等。
- **关键因素**:抗原抗体的比例最为重要。
#### 二十、免疫固定电泳
- **定义**:免疫固定电泳是一种将区带电泳和免疫沉淀反应相结合的技术。
- **应用场景**:用于纯化抗原和抗体成分分析,M蛋白的鉴定等。
#### 二十一、双向扩散试验
- **定义**:双向扩散试验是一种利用抗原和抗体在凝胶中自由扩散并形成沉淀线的技术。
- **应用场景**:用于检测未知抗原的存在及其浓度。
#### 二十二、M蛋白类型的鉴定方法
- **定义**:M蛋白是指由单一浆细胞系产生的免疫球蛋白,其类型鉴定对于血液病的诊断十分重要。
- **常用方法**:免疫固定电泳因其高效准确而成为首选方法。
#### 二十三、抗原和抗体最佳工作浓度的选择方法
- **定义**:方阵滴定法是一种通过系统地改变抗原和抗体的比例来确定最佳工作浓度的方法。
- **应用场景**:确保抗原抗体反应在最适比例条件下进行。
#### 二十四、免疫速率散射比浊法
- **定义**:免疫速率散射比浊法是一种测定抗原抗体复合物形成的速率,以此来定量抗原的方法。
- **应用场景**:适用于需要快速定量测定的情况。
- **测量方法**:分为终点法和速率法两种。
#### 二十五、单向扩散试验平板法
- **定义**:单向扩散试验平板法是一种利用抗原向含有抗体的凝胶内扩散形成沉淀环的技术。
- **应用场景**:用于抗原的定量测定。
- **注意事项**:Mancini曲线适用于大分子抗原的长时间扩散结果处理。