### GE公司凝胶选择指南知识点解析
#### 一、凝胶概述
**GE Healthcare**作为全球领先的生物科技解决方案提供商，其推出的凝胶选择指南为研究人员提供了全面的指导，帮助他们在分子筛、凝胶过滤层析以及蛋白质纯化等领域做出最优选择。
#### 二、凝胶类型及其特性
1. **Sephadex**：由葡聚糖构成的凝胶，适用于不同大小分子的分离。
- 特点：良好的物理稳定性和化学稳定性。
- 应用：蛋白质、核酸等生物大分子的分离纯化。
2. **Sepharose**：基于琼脂糖基质的凝胶，具有更高的机械强度和化学稳定性。
- 特点：适用于高压操作环境。
- 应用：广泛用于亲和层析等复杂蛋白质的纯化过程。
3. **Sepharose CL**：改良版Sepharose，具有更宽的操作温度范围。
- 特点：适用于较温和条件下的层析操作。
- 应用：蛋白质和抗体的纯化。
4. **Sepharose FF**：快速流动型Sepharose，适合高通量处理。
- 特点：流速快，适用于大规模生产。
- 应用：工业规模蛋白质纯化。
5. **Superose**：专用于大分子的凝胶过滤层析。
- 特点：高分辨率，适用于超大分子复合体的分离。
- 应用：蛋白质复合体的结构分析。
6. **Sepharose HP**：高性能Sepharose，适用于高分辨率的层析操作。
- 特点：极高的分辨率和稳定性。
- 应用：高精度蛋白质纯化。
7. **Superdex**：改进版Sepharose，用于蛋白质和多肽的分离。
- 特点：优异的分辨率和稳定性。
- 应用：蛋白质和多肽的快速高效分离。
8. **Sepharose Bigbeads**：大颗粒Sepharose，适用于高流速操作。
- 特点：流速快，适用于大规模蛋白质纯化。
- 应用：工业级高通量蛋白质纯化。
9. **Streamline**：专为快速处理设计的凝胶。
- 特点：流速快，适用于高通量筛选。
- 应用：快速蛋白质纯化。
10. **Sepharose XL**：高载量Sepharose，适用于高浓度样品的处理。
- 特点：能够承受高浓度样品，减少批次数量。
- 应用：大规模蛋白质纯化。
11. **Capto**系列：用于特定蛋白质的捕获和纯化。
- 特点：针对特定目标分子进行优化。
- 应用：特定抗体和蛋白质的纯化。
12. **Mabselect SuRe/Xtra**：专用于单克隆抗体的纯化。
- 特点：高特异性结合能力。
- 应用：单克隆抗体的大规模生产。
13. **Dextrin Sepharose HP**：基于右旋糖酐的凝胶，用于特定蛋白质的纯化。
- 特点：适合特定分子的结合。
- 应用：特定蛋白质的纯化。
14. **Streptactin Sepharose HP**：用于含有Streptactin标签的蛋白质纯化。
- 特点：高度特异性结合。
- 应用：含Streptactin标签蛋白质的纯化。
15. **Ni Sepharose HP**：用于His标签蛋白质的纯化。
- 特点：高亲和力结合。
- 应用：His标签蛋白质的纯化。
16. **Glutathione Sepharose HP**：用于GST融合蛋白的纯化。
- 特点：高度特异性结合。
- 应用：GST融合蛋白的纯化。
17. **Protein G Sepharose HP**和**Protein A Sepharose HP**：用于抗体的纯化。
- 特点：高特异性结合能力。
- 应用：抗体的纯化。
18. **SOURCE**系列：高速低反压介质。
- 特点：快速且稳定。
- 应用：工业级蛋白质纯化。
#### 三、层析技术应用实例
1. **去除内毒素**：
- 方法：利用疏水层析去除内毒素。
- 介质选择：选择能结合目标蛋白同时去除内毒素的介质。
- 备选方案：利用Q或DEAE Sepharose Fast Flow介质通过高盐缓冲液或NaOH去除内毒素；利用CNBr或NHSSepharose FF偶联内毒素底物（如LAL、PMB）形成亲和层析介质；利用凝胶过滤层析去除多聚体形式的内毒素。
2. **去除核酸**：
- 方法：利用阳离子交换介质去除核酸。
- 介质选择：例如SP Sepharose BigBeads或SP Sepharose FF等。
- 备选方案：使用核酸酶将核酸切割成小片段，再通过凝胶过滤层析去除。
3. **去除病毒和微生物**：
- 方法：结合不同层析技术和使用注射用水、NaOH进行在位消毒和清洗。
- 备选方案：利用与目标蛋白电荷相反的S/D (solvent/detergent)方法去除病毒的脂质外壳。
#### 四、总结
GE Healthcare提供的凝胶选择指南涵盖了从基础到高级的应用，不仅包括了不同类型的凝胶及其特点，还深入介绍了在实际操作中如何根据不同需求选择合适的凝胶和层析技术。这些知识对于从事生物制药、蛋白质研究等领域的人来说是非常宝贵的资源。通过合理选择凝胶类型和技术，可以显著提高纯化效率和产品质量，从而推动科研进展和产业创新。
