等位基因特异性影响细胞外超氧化物歧化酶的合成和分泌

VIP专享 2020-06-05 14:25:33 802KB PDF
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129只小鼠的血浆细胞外超氧化物歧化酶(ecSOD)浓度比C57株高(2-3倍)。 我们先前报道了129株携带该酶的不同等位基因,其特征在于两个氨基酸取代和mRNA 3'UTR中的10 bp缺失。 取代之一在信号肽切割位点(21位),而另一个在催化位点内。 由于血浆酶浓度的差异在表达不同等位基因的同基因小鼠中仍然存在,因此血浆浓度的差异似乎主要由等位基因驱动,并且与基因组的其余部分无关。 不出所料,使用兔网织红细胞裂解物进行的体外翻译在转录本的翻译效率和新合成酶的加工方面均未见差异。 在稳定转染的CHO细胞中该酶的两种同工型的合成和分泌速率的测定清楚地表明,成熟的129变体的合成速率接近野生型同型异构体的两倍,并且细胞内池大小是其两倍。 但是,两种同工型都以相同的分数速率分泌,并且具有相同的细胞内T1 / 2以及相似的降解程度。 这些数据至少部分地解释了表达129变体的同基因小鼠中较高水平的ecSOD,以及129小鼠品系中的酶水平。 在计算机计算中支持该结论,并表明信号肽切割位点(N21D)的aa改变导致129变体在该位点的切割概率大大增加。 我们的结果也突出了信号肽裂解在确定分泌蛋白

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