论文研究 - 多年生病毒诱导基因沉默（VIGS）系统的建立

近年来开发的病毒诱导基因沉默（VIGS）技术是一种通过反向遗传学快速鉴定植物基因功能的技术。 它是转录后基因沉默机制的体现。 与传统的转基因技术相比，VIGS是一种瞬时表达系统，可以在短时间内获得良好的结果。 目前，它被广泛用于研究植物基因的功能，但其中大多数是模型植物，并且实验总是在室内环境中在光照和温度条件下进行的。 在这项研究中，我们创造性地提供了一种在野外条件下使用多年生罗莎植物作为实验材料建立VIGS系统的方法。 以RrGT1基因为报告基因，并以修饰的TRV-GFP病毒为载体，构建了重组病毒载体，并以多年生的R. rugosa“ Zizhi”和R. davurica为实验验证材料。 根据蔷薇植物的生长条件，田间的自然环境和发生VIGS的最佳条件，确定接种时期，感染液的制备，病毒的接种技术等技术问题。载体和接种后培养的植物材料的光照和温度条件被一一求解。 当RrGT1基因沉默时，罗莎植物显示出淡花瓣的表型。 通过检测，发现内源性RrGT1基因的表达显着下调，所有花色苷的含量也显着降低。 因此，我们认为在田间条件下在多年生罗莎植物中建立VIGS系统的尝试非常成功。