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珍贵束丝放线菌橙色亚种中磷酸葡萄糖变位酶鉴定,范宇翔,刘婷,安丝菌素P-3 是由珍贵束丝放线菌橙色亚种生产的一类大环内酰胺类抗生素。因其卓越的抗肿瘤活性,成为近年来的一个研究热点。磷酸�
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珍贵束丝放线菌橙色亚种中磷酸葡萄糖
变位酶鉴定
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范宇翔,刘婷,韦柳静,花强
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(华东理工大学生物反应器国家重点实验室,上海市 200237) 5
基金项目:博士点基金博导类(20130074110002)
作者简介:范宇翔(1986-),男,博士,主要研究方向:放线菌中心碳代谢流量分析
通信联系人:花强(1971-),男,教授,博士生导师,主要研究方向:1. 微生物细胞的代谢工程及
系统生物技术开发;2. 细胞基因组规模代谢网络模型的开发及应用研究. E-mail: qhua@ecust.edu.cn
摘要:安丝菌素 P-3 是由珍贵束丝放线菌橙色亚种生产的一类大环内酰胺类抗生素。
因其卓越的抗肿瘤活性,成为近年来的一个研究热点。磷酸葡萄糖变位酶催化葡萄糖-6-磷
酸( G6P)和葡萄糖-1-磷酸( G1P)之间地转化。磷酸葡萄糖变位酶决定了安丝菌素从中
心碳代谢的碳骨架流量。但是目前仍然没有发现可以催化葡萄糖-6-磷酸转化成葡萄糖-1-10
磷酸进而进入安丝菌素合成的磷酸葡萄糖变位酶的信息。本文最终通过比对其他放线菌来源
的磷酸葡萄糖变位酶编码基因和蛋白序列,发现并最终通过酶学水平分析验证了 asm6327
基因编码珍贵束丝放线菌橙色亚种中磷酸葡萄糖变位酶。
关键词:代谢工程;珍贵束丝放线菌橙色亚种;安丝菌素;磷酸葡萄糖变位酶
中图分类号:Q-515
Identification of phosphoglucomutase in Actinosynnema
pretiosum
Fan Yuxiang, Liu ting, Wei Liujing, Hua Qiang
(State Key Laboratory of Bioreactor Engineering, East China University of Science and 20
Technology, Shanghai 200237)
Abstract:Ansamitocin P-3 (AP-3), an amacrocyclic lactamcompound, is produced by
Actinosynnema pretiosum. As agroup of maytansinoid antibiotics, ansamitocins have an extraordinary
antitumor activity by blocking the assembly oftubulin forming into functional microtubules.
Phosphoglucomutase (PGM) catalyzes the conversion of glucose-6-phosphate (G6P) to 25
glucose-1-phosphate (G1P). G1P was subsequently converted into UDP-glucose (UDPG), the original
precursor for ansamitocins biosynthesis. Hence, PGM plays a crucial role in guiding the flux toward
the synthesis of UDPG from central carbon metabolic pathway.The annotation of phosphoglucomutase
(PGM) was, however, still unknown.Through blasting the heterologous PGM protein sequence in A.
mirum,asm6327 gene was found to be the candidate gene. Analysis of enzyme activity has confirmed 30
that asm6327 gene encodes PGM in A. pretiosum.
Keywords: Metabolic engineering; Actinosynnema pretiosum; ansamitocins;
phosphoglucomutase
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