人纤溶酶原Kringle5基因的克垄表达及产物纯化和性质鉴定 (2001年)

根据人纤溶酶原的cDNA序列,利用PCR技术获得人纤溶酶原kringle5结构域的基因,并将其克隆至表达质粒pET25b(＋)中。重组载体pET25b(＋)/kringle5转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达,在12kD处可见明显的表达条带,表达产物大部分以无活性的包涵体形式存在。包涵体经过体外变复性,SP-SepharoseFF离子交换柱一步纯化,15％SDsPAGE鉴定考染一条带,纯度达95％以上。所得到的目标蛋白能明显的抑制bFGF诱导的牛毛细血管内皮细胞增生。